Характеристики гепариназы I

Гепариназа I, производимая компанией Beijing Asriel Biotechnology Co., Ltd., обладает следующими характеристиками.
1. Природная гепариназа, полученная из природных бактерий, расщепляющих гепарин.
2. Обладает высокой удельной активностью (417 МЕ/мг).
3. Чистый фермент, не содержащий БСА или других примесей белков.
4. Хорошая стабильность, с неизменной воспроизводимостью от партии к партии и характеристиками деградации.

Форма и состав гепариназы I

Гепариназа I находится в растворе.

Механизм действия, субстратная специфичность и определение единицы действия гепариназы I.

Механизм действия гепариназы I: Гепариназа избирательно расщепляет α(1-4) гликозидную связь между глюкозамином и уроновой кислотой в сульфатированных гепарин-гликанах. Этот процесс расщепления осуществляется посредством реакции элиминации с образованием олигосахаридов, содержащих ненасыщенные остатки уроновой кислоты (двойные связи, расположенные между C4 и C5). Продукты распада могут быть обнаружены с помощью УФ-спектроскопии (232 нм).
Субстратная специфичность гепариназы I: гепарин, гепарансульфат (относительная активность примерно 3:1).
Определение активных единиц гепариназы I: 1 единица (1 МЕ) гепариназы I производит 1 мкмоль ненасыщенной уроновой кислоты в минуту при pH 7,0 и 30 °C. 1 МЕ приблизительно равна 600 единицам (сигма-единицам).

Как использовать гепариназу I

В соответствии с требованиями к применению, для получения раствора гепариназы I необходимой концентрации было добавлено соответствующее количество буферного раствора.

Стабильность и методы хранения гепариназы I

Гепариназа I хранится при температуре -20 °C в темноте, срок годности составляет около 12 месяцев;
Разбавленную гепариназу I следует хранить при температуре -20 °C во избежание загрязнения.
Гепариназа I транспортируется на большие расстояния и требует использования сухого льда в качестве хладагента.

Меры предосторожности при применении гепариназы I

Гепариназа I подходит для расщепления гепарина и гепарансульфата и может использоваться только в лабораторных научных исследованиях, диагностике in vitro и промышленном контроле качества; ее нельзя использовать в качестве лекарственного средства или для диагностики in vivo.

Пример применения гепариназы

Гепариназа находит широкое применение в научных исследованиях и промышленности, например:
Деградация гепарина для структурного анализа, например, тест на скорость образования 1,6-кольца эноксапарина натрия, профилирование дисахаридов гепарина натрия.
Гепарин частично расщепляется с получением низкомолекулярного гепарина, который затем подвергается химической модификации или прививке к другим материалам.
Определение источника разложения неочищенного гепарина (ПЦР в реальном времени)
Расщепление гепарина и гепарансульфата для получения гепариновых дисахаридов и гепариновых олигосахаридов
Обработка плазмы или других тканей для дальнейших исследований.
Крупномасштабное производство тинзапарина
Гепариназа I, гепариназа II и гепариназа III обычно используются вместе.

Ссылки на гепариназу I

1. Линкер, А., и Ховинг, П. Мет. Энзимол. 28, 902, (1972)

2. Лозе, Д.Л., и Линхардт, Р.Дж.Дж. Биол. химия 267, 24347, (1992)

О гепарине и гепарансульфате

Гепарин и гепарансульфат являются гликозаминогликанами (ГАГ), представляющими собой линейные смеси полисахаридов, связанных повторяющейся дисахаридной единицей, состоящей из уроновой кислоты (D-глюкуроновой кислоты или L-идуроновой кислоты) и повторяющейся дисахаридной единицы D-глюкозамина/N-ацетилглюкозамина. Степень сульфатирования каждого моносахаридного остатка может варьироваться, при этом он может содержать от нуля до трех сульфатных групп. В целом, гепарансульфат менее сульфатирован, чем гепарин.
Гепарин и его производное, низкомолекулярный гепарин, являются широко используемыми антикоагулянтами. Гепариназа играет важную роль в исследованиях и производстве гепарина и низкомолекулярного гепарина.