В1: Какова основная функция... тестер пределов микробной активности?

А1: Прибор для определения микробного содержания — это, по сути, устройство для измерения микробного состава. Он в основном определяет общее количество аэробных бактерий, плесени и дрожжей в образцах, таких как фармацевтические препараты, продукты питания и косметика. Он гарантирует, что микробное загрязнение соответствует нормативным требованиям, таким как Китайская фармакопея или стандарты USP. Его основная задача — улавливать или культивировать микроорганизмы в образцах. Он использует точную мембранную фильтрацию или прямую инокуляцию. Таким образом, можно проводить количественный или качественный анализ микробного состава.

В2: Какие ключевые этапы входят в стандартный операционный процесс?

А2: Рассмотрим в качестве примера распространенный метод мембранной фильтрации. Этапы следующие:

• Подготовка

Сначала включите бокс биологической безопасности или чистый рабочий стол. Проведите УФ-стерилизацию в течение 30 минут. Проверьте питательные среды, такие как TSA и SDA. Они должны быть стерилизованы и соответствовать сроку годности. Подготовьте стерильные фильтрующие чашки, фильтрующие мембраны (обычно с размером пор 0,22 или 0,45 мкм) и промывочный раствор (например, буфер с полисорбатом).

• Подготовка образцов

Жидкие образцы можно фильтровать напрямую. Твердые образцы необходимо сначала растворить или гомогенизировать, а затем отфильтровать. Объем образца соответствует правилам фармакопеи. Обычно это от 10 до 100 мл или граммов.

• Фильтрация и промывка

Пропустите образец через стерильную фильтрующую мембрану. Используйте устройство для фильтрации под отрицательным давлением, чтобы завершить фильтрацию. Промойте фильтрующую мембрану 3 раза промывочным раствором (по 100 мл каждый раз). Это удалит антимикробные компоненты из образца.

• Инкубация и подсчет

Перенесите фильтрующую мембрану на чашку Петри с культуральной средой. Инкубируйте аэробные бактерии при температуре 30–35°C в течение 3–5 дней. Инкубируйте плесневые грибы/дрожжи при температуре 20–25°C в течение 5–7 дней. Подсчитайте количество колоний. Рассчитайте микробное содержание на единицу образца. Единица измерения: КОЕ/г или КОЕ/мл.

В3: Какие меры предосторожности чаще всего упускаются из виду во время работы?

А3: Эти моменты, которые легко упустить из виду, требуют особого внимания:

• Экологический контроль

Работайте только в зонах с надлежащим уровнем чистоты, например, в помещениях класса А. Это позволит избежать перекрестного заражения. Регулярно проверяйте поток воздуха в боксе биологической безопасности и эффективность высокоэффективных фильтров. Не ждите возникновения проблем для проверки.

• Выбор фильтрующей мембраны и раствора для промывки

Материал фильтрующей мембраны должен соответствовать образцу. Например, гидрофобные образцы требуют предварительной обработки гидрофильными мембранами. Если образец содержит антимикробные компоненты, его необходимо тщательно промыть. В противном случае результаты могут быть ложноотрицательными и неточными.

• Контроль качества питательной среды

Перед использованием проверьте питательную среду на стерильность. Также проведите тесты на стимуляцию роста. Убедитесь, что они пригодны для использования. Не допускайте образования слишком большого количества конденсата на поверхности питательной среды. Это влияет на распределение колоний и делает подсчет неточным.

• Регистрация данных и обработка отклонений

Записывайте рабочие параметры в режиме реального времени, такие как время фильтрации и объем промывки. Следуйте принципу ALCOA+. Обеспечьте полноту данных. Если вы обнаружите отклонения от нормы, например, повреждение фильтрующих мембран или загрязнение культуральной среды, немедленно прекратите эксперимент. Начните расследование отклонений. Не заставляйте эксперимент продолжаться.

Вопрос 4: Как проверить коэффициент восстановления микробного лимит-тестера?

A4: Проверка коэффициента восстановления гарантирует достоверность результатов теста. Процесс выглядит следующим образом:

Сначала проведите контрольный тест. Добавьте к образцу стандартные штаммы известной концентрации — например, золотистый стафилококк и аспергиллез нигер. Профильтруйте и инкубируйте. Рассчитайте отношение фактически выделенных бактерий к теоретическому значению. Целевой показатель выделения составляет не менее 70%.

Затем устраните мешающие факторы. Проверьте, влияет ли сам образец на рост микроорганизмов — например, наличие в нем антибиотиков или консервантов. Если влияет, добавьте нейтрализатор. Или проведите дополнительные этапы разбавления.

Наконец, сравните методы. Сравните результаты мембранной фильтрации и прямой инокуляции. Убедитесь в согласованности результатов обоих методов. Убедитесь, что метод работает.

В5: Каковы ключевые моменты для ежедневного технического обслуживания и калибровки?

А5: Ежедневное техническое обслуживание и калибровка должны быть сосредоточены на следующих аспектах:

• Техническое обслуживание оборудования

Ежедневно очищайте интерфейс фильтрующей чашки. Своевременно заменяйте емкость для отработанной жидкости. Избегайте накопления биологических загрязнений. Ежемесячно проверяйте стабильность давления вакуумного насоса. Рекомендуемый диапазон составляет от -0,08 до -0,1 МПа. При выходе за пределы диапазона выполните корректировку.

• Требования к калибровке

Ежегодно привлекайте стороннюю организацию для калибровки расходомеров, датчиков давления и таймеров. Обеспечьте точность данных. Регулярно проверяйте эффективность фильтрации. Используйте стандартные бактериальные мембраны, например, с размером пор 0,45 мкм. Проверяйте эффективность фильтрации.

• Управление расходными материалами

Храните фильтрующие мембраны и питательные среды в соответствии с правилами хранения — например, в защищенном от света месте при низкой температуре. Запишите дату вскрытия упаковки. Никогда не используйте просроченные расходные материалы или материалы с поврежденной упаковкой. Они испортят результаты эксперимента.

В6: Как избежать ложноположительных/ложноотрицательных результатов во время работы?

А6: Предотвратить с двух сторон:

• Предотвращение ложных срабатываний

Строго соблюдайте правила асептики. Используйте стерильные перчатки. Быстро заменяйте их, если они загрязнятся или порвутся. Не пренебрегайте правилами. Протирайте рабочий стол 75%-ным этанолом до и после эксперимента. Тщательно дезинфицируйте. Избегайте внешнего микробного загрязнения.

• Предотвращение ложноотрицательных результатов

Убедитесь, что в образце не осталось остатков антимикробных компонентов. Добавьте нейтрализатор. Или тщательно промойте, чтобы удалить антимикробные вещества. Проверьте герметичность системы фильтрации. Не допускайте утечки микроорганизмов. В противном случае они не будут обнаружены, что приведет к ложноотрицательным результатам.

В7: Что делать, если фильтрующая мембрана засорилась или скорость потока стала ненормальной?

А7: Две ситуации, очевидные решения:

• Засорение фильтрующей мембраны

Прекратите эксперимент. Замените фильтрующую мембрану на новую. Если засорение происходит часто, проверьте предварительную обработку образца. Убедитесь, что в твердых образцах нет слишком большого количества частиц, которые не были должным образом удалены.

• Аномальная скорость потока

Сначала проверьте, достаточно ли давления вакуумного насоса. Отрегулируйте его, если нет. Затем проверьте трубопровод на наличие утечек. Устраните их, если они обнаружены. При необходимости очистите фильтрующий трубопровод. Или замените его напрямую. Поддерживайте нормальный расход.

Предупреждение: Данный веб-сайт уважает права интеллектуальной собственности. В случае обнаружения каких-либо нарушений, пожалуйста, своевременно свяжитесь с администрацией сайта для принятия соответствующих мер.