В1: Какова основная функция тестер микробного предела?

А1: Микробный тестер предельной концентрации — это устройство для измерения микробной обсеменённости. Он, в основном, определяет общее количество аэробных бактерий, плесени и дрожжей в образцах, таких как фармацевтические препараты, продукты питания и косметика. Он проверяет их микробное загрязнение на соответствие нормативным требованиям, таким как Китайская фармакопея или стандарты Фармакопеи США. Его основная задача — улавливание или культивирование микроорганизмов в образцах. Он использует точную мембранную фильтрацию или прямую инокуляцию. Таким образом, можно проводить количественный и качественный анализ микробной обсеменённости.

В2: Какие основные этапы входят в стандартный операционный процесс?

А2: Рассмотрим в качестве примера распространённый метод мембранной фильтрации. Он включает следующие этапы:

• Препараты

Сначала включите бокс биологической безопасности или лабораторный стол. Проведите УФ-стерилизацию в течение 30 минут. Проверьте питательные среды, такие как TSA и SDA. Они должны быть стерилизованы и иметь срок годности. Подготовьте стерильные фильтры, фильтрующие мембраны (обычно с размером пор 0,22 или 0,45 мкм) и промывочный раствор (например, буфер с полисорбатом).

• Подготовка образцов

Жидкие образцы можно фильтровать напрямую. Твёрдые образцы необходимо сначала растворить или гомогенизировать, а затем отфильтровать. Объём образца определяется согласно фармакопейным правилам. Обычно он составляет от 10 до 100 мл или граммов.

• Фильтрация и промывка

Пропустите образец через стерильную фильтровальную мембрану. Для завершения фильтрации используйте устройство фильтрации с отрицательным давлением. Промойте фильтровальную мембрану три раза промывочным раствором по 100 мл каждый раз. Это позволит удалить антимикробные компоненты из образца.

• Инкубация и подсчет

Перенесите мембранный фильтр на чашку с питательной средой. Инкубируйте аэробные бактерии при температуре 30–35°C в течение 3–5 дней. Инкубируйте плесень/дрожжи при температуре 20–25°C в течение 5–7 дней. Подсчитайте количество колоний. Рассчитайте микробную обсемененность в единице образца. Единица измерения – КОЕ/г или КОЕ/мл.

В3: Какие меры предосторожности чаще всего игнорируются во время работы?

А3: Этим моментам, которые легко упустить из виду, следует уделить особое внимание:

• Экологический контроль

Работайте только в помещениях с гарантированной чистотой, например, класса А. Это позволит избежать перекрёстного заражения. Регулярно проверяйте воздушный поток и эффективность высокоэффективного фильтра в боксе биологической безопасности. Не ждите, пока возникнут проблемы.

• Выбор фильтрующей мембраны и промывочного раствора

Материал мембранного фильтра должен соответствовать образцу. Например, гидрофобные образцы требуют предварительной обработки гидрофильными мембранами. Если образец содержит антимикробные компоненты, тщательно промойте его. В противном случае результаты могут быть ложноотрицательными и неточными.

• Контроль качества питательной среды

Перед использованием проверьте стерильность питательной среды. Также проведите тесты на стимуляцию роста. Убедитесь, что среда пригодна к использованию. Не допускайте образования слишком большого количества конденсата на поверхности питательной среды. Это влияет на распределение колоний и делает подсчёт неточным.

• Регистрация данных и обработка отклонений

Регистрируйте рабочие параметры в режиме реального времени, такие как время фильтрации и объём промывки. Следуйте принципу ALCOA+. Сохраняйте полноту данных. При обнаружении отклонений, таких как повреждение мембран фильтра или загрязнение питательной среды, немедленно остановите эксперимент. Начните расследование отклонений. Не форсируйте продолжение эксперимента.

В4: Как проверить скорость восстановления тестера предельного содержания микроорганизмов?

А4: Проверка скорости восстановления гарантирует достоверность результатов теста. Процесс включает:

Сначала проведите положительный контрольный тест. Добавьте в образец стандартные штаммы известной концентрации, например, Staphylococcus aureus и Aspergillus niger. Отфильтруйте и инкубируйте. Рассчитайте соотношение фактического количества выделенных бактерий к теоретическому значению. Целевой процент выделения должен быть не менее 70%.

Затем устраните помехи. Проверьте, не влияет ли сам образец на рост микроорганизмов, например, наличие в нём антибиотиков или консервантов. Если да, добавьте нейтрализатор. Или проведите дополнительные этапы разбавления.

Наконец, сравните методы. Сравните результаты мембранной фильтрации и прямой инокуляции. Убедитесь, что оба метода согласованы. Убедитесь, что метод работает.

В5: Каковы основные моменты ежедневного обслуживания и калибровки?

А5: Ежедневное обслуживание и калибровка направлены на следующее:

• Техническое обслуживание оборудования

Ежедневно очищайте интерфейс фильтра. Незамедлительно заменяйте бутылку для сбора отработанной жидкости. Не допускайте накопления биологических загрязнений. Ежемесячно проверяйте стабильность давления вакуумного насоса. Рекомендуемый диапазон составляет от -0,08 до -0,1 МПа. Отрегулируйте давление, если оно выходит за пределы диапазона.

• Требования к калибровке

Ежегодно привлекайте сторонних специалистов для калибровки расходомеров, датчиков давления и таймеров. Обеспечьте точность данных. Регулярно проверяйте эффективность фильтрации. Используйте стандартные бактериальные мембраны, например, с размером пор 0,45 мкм. Проверьте эффективность фильтрации.

• Управление расходными материалами

Храните фильтрующие мембраны и питательные среды в соответствии с правилами хранения: в защищенном от света месте и при низкой температуре. Запишите дату вскрытия. Никогда не используйте просроченные расходные материалы. Или материалы в поврежденной упаковке. Они могут испортить результаты эксперимента.

В6: Как избежать ложноположительных/ложноотрицательных результатов во время работы?

А6: Предотвратить с двух сторон:

• Предотвращение ложных срабатываний

Строго соблюдайте правила асептики. Используйте стерильные перчатки. Немедленно меняйте их, если они загрязнятся или повредятся. Не экономьте на результатах. Протирайте рабочее место 75% этанолом до и после эксперимента. Тщательно дезинфицируйте. Избегайте внешнего микробного загрязнения.

• Предотвращение ложноотрицательных результатов

Убедитесь, что в образце нет остатков антимикробных компонентов. Добавьте нейтрализатор. Или тщательно промойте, чтобы удалить антимикробные компоненты. Проверьте герметичность системы фильтрации. Не допускайте утечки микроорганизмов. В противном случае они не будут обнаружены, что приведёт к ложноотрицательным результатам.

В7: Что делать, если мембрана фильтра засорилась или скорость потока ненормальная?

А7: Две ситуации, ясные решения:

• Засорение мембраны фильтра

Остановите эксперимент. Замените фильтрующую мембрану на новую. Если засорение происходит часто, проверьте предварительную обработку образцов. Проверьте, не слишком ли много твердых частиц в образцах, которые не удалось удалить должным образом.

• Аномальный расход

Сначала проверьте, достаточно ли давления вакуумного насоса. Отрегулируйте, если оно недостаточно. Затем проверьте наличие утечек в трубопроводе. При необходимости устраните их. При необходимости очистите трубопровод фильтра. Или замените его. Поддерживайте нормальную скорость потока.

Отказ от ответственности: Этот сайт уважает права интеллектуальной собственности. В случае обнаружения каких-либо нарушений, пожалуйста, незамедлительно свяжитесь с сайтом для решения проблемы.